-
Происхождение:
-
человек, эндотелий пупочной вены. Культура раннего пассажа (1 пассаж)
-
Морфология:
-
эпителиоподобная
-
Способ культивирования:
-
монослойный
-
Условия культивирования:
-
среда – ENDOBOOST (среда для эндотелиальных клеток человека), 1% пенициллина/стрептомицина (GIBCO, США) и 1% L-глютамина (GIBCO, США).
Клетки растут на поверхности культурального пластика, покрытого 0,2% желатином.
Процедура пересева – снятие клеток используя раствор трипсина (0,25%) с ЭДТА (0,02%).
Кратность рассева: 1:2 - 1:3.
Посевная доза: 5 000 - 10 000 кл/см².
Криоконсервация – 90% фетальная бычья сыворотка, 10% DMSO. 1.5-2.0х106 клеток/мл в ампуле
-
Жизнеспособность после криоконсервации:
-
>80 % (окраска трипановым синим сразу после размораживания)
-
Контроль контаминации:
-
бактерии, грибы и микоплазмы (Mycoplasma orale, M. arginini, M. fermentans, M. hominis, M. hyorhinis, M. gallisepticum, M. genitalium, M. penetrans, M. pneumonia, M. salivarium, Acholeplasma laidlawii) методами PCR-RT и окрашиванием флуоресцентным красителем Hoechst-33258 не обнаружены.
-
Кариология:
-
2n=46
-
Туморогенность:
-
не туморогенны
-
Другие характеристики:
-
Продуцирует ряд физиологических для эндотелия факторов, что характеризует ее функциональную активность. Методом иммуноцитохимии показана положительная реакция на маркеры CD31 (PECAM-1), vWF (фактор Виллебранда), VE-кадгерин (CD144). Подтверждение PCR-RT.
Культура не онкогенная (in vitro, по данным образования очагов в мягком агаре), проверка на присутствие вирусов не проводилась.
-
Область применения:
-
клеточная биология, биотехнология
-
Коллекции:
-
Коллекция культур клеток позвоночных Института цитологии РАН, г. Санкт-Петербург